反相液相色谱 二维ACQUITY UPLC M-Class系统

参考信息

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二维ACQUITY UPLC M-Class系统

利用二维分离扩展分析动态范围。

二维ACQUITY UPLC? M-Class系统拓宽了亚2 μm颗粒的局限，可实现高峰容量的分离。这一创新的系统有效使二维（2D）UPLC通过运用双反相（RP）方法提高复杂蛋白质组学分析样品的色谱分离度。

肽类多样的离子结构和疏水性结构在两个维度都实现高分离度

更出色的蛋白质鉴定、定量分析能力和序列覆盖率

提高分离效果，优化方法生成向导并增强数据算法

全面的二维技术——扩大应用范围。 传统的2D-LC使用的是离子交换（IEX）和反相（RP）色谱。所有IEX方法都要使用含盐的缓冲剂，如果缓冲剂进入了质谱仪（MS），可能会引起电离背景和污染问题。由于IEX分离仅基于肽类的电荷，IEX维度常常导致较差的色谱分离度，这时肽类会以多种馏分的形式出现，使数据解析变得非常困难。 这一改进的2D方法在第一维度使用pH为10的RP，然后在第二维度使用pH为2的RP，得到了远远好于传统IEX方法的结果。

一流的重现性确保准确的鉴定结果 通过2D-LC分离获得了越来越多的准确鉴定结果。我们可以看到更多基于2D-LC的可重现蛋白质鉴定。

在两个维度都达到更高分离度。

当第一维度使用离子交换作为分离方法时，可能会导致分离度较差和馏分间的流失。在第一步使用高分离度技术支持，可确保在*后一步为您提供更丰富的信息。在pH为10的条件下使用反相色谱，接着在较低pH条件下利用亚2 μm颗粒技术进行分离，可获得有用的正交分离结果，并生成高质量的数据。

更高的分离度意味着更出色的蛋白质鉴定结果。

在此分离中，通过分析大肠杆菌的胰蛋白酶消化物证实了2D-LC分离复杂蛋白质组学样品的能力。通过在一个维度中使用ACQUITY? UPLC M-Class，在色谱柱上加载0.5 μg样品进行分离，从而在2874种肽中鉴定出365种蛋白质。添加2.5 μg样品至2D-LC系统，分别通过5步和10步分离鉴定出7661种和9415种肽。

2D-LC可实现：

• 在更加准确的基础上鉴定出两倍于传统方法的蛋白质

• 增加多肽回收率

• 更可靠的检测结果和更高的蛋白质覆盖率

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