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等温扩增技术(Isothermal Amplification Technology)是核酸体外扩增技术,其反应过程始终维持在恒定的温度下,通过添加不同活性的酶和各自特异性引物来达到快速核酸扩增的目的。常见的等温扩增技术有以下几种: GenieⅡ: 紧凑型设计,支持内置蓄电池运行模式,体积轻巧; * Genie 实时等温扩增系统,检测技术,采用全封闭式反应体系,无需进行任何扩增 后处理,避免了产物交叉感染的可能; Genie? II Strip 每个Strip包含8孔,工作体积为20-150μl Genie? II Strip Holder Genie? II Carry Case
Isothermal Mastermix:The Mixture of reagents for DNA/RNA amplification which contains enzymes, dNTPs, fluorescent dye, and optimized buffer. LAMP Designer
Isothermal Amplification Made Simple |
| Technical Specifications 样品量 16 wells (2 x 8 strips) 样品容积 20 μl to 150 μl 触摸屏 TFT / LCD (800x480)背光式触摸屏 热盖 电阻陶瓷 制冷方式 强制对流 温度传感器 高精度热敏电阻 控温方式 多区域独立数字化PID控制 温控范围 室温-110°C 温度精度 ±0.1°C 温度均一性 ±0.2°C 温度梯度范围 0-8°C 激发光波长 470nm 检测光波长 510nm 工作环境温度 10°C - 40°C 功率 150W 尺寸 20cm (H) X 21cm (D) X 30cm (W) 重量 2kg Code Description GEN-0002 Genie II IMM-0100 Isothermal Master Mix (100 reactions) |
等温扩增技术(Isothermal Amplification Technology)是核酸体外扩增技术,其反应过程始终维持在恒定的温度下,通过添加不同活性的酶和各自特异性引物来达到快速核酸扩增的目的。常见的等温扩增技术有以下几种: * 环介导核酸等温扩增技术(LAMP) loop-mediated isothermal amplification , LAMP是2000 年开发的一种新颖的恒温核酸扩增方法,其特点是针对靶基因的6 个区域设计4 种特异引物,利用一种链置换DNA 聚合酶在等温条件(63 ℃左右) 保温30-60分钟,即可完成核酸扩增反应。与常规PCR相比,不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程。LAMP 是一种全新的核酸扩增方法,具有简单、快速、特异性强的特点。 * 滚环扩增技术 RCA 滚环扩增技术(RCA)是近年来发展起来的一种新型的核酸扩增技术。该技术是基于连接酶连接、引物延伸、与链置换扩增反应的一种等温核酸扩增方法。在恒温的条件下,可以产生大量的与环型探针互补的重复序列。与传统的核酸扩增方法相比,它具有扩增条件简单,特异性高,能在恒温条件下进行等特点。滚环扩增技术结合荧光、电化学、电化学发光等检测技术可以实现高灵敏的生物分子检测。 * 单引物等温扩增 SPIA 同一温度(42℃),在MMLV酶与一条引物的相互作用下,首先合成模板的互补DNA单链,互补DNA单链自身成环形成钥匙结构,并在MMLV酶的作用下形成T7 RNA聚合酶的启动子识别区域,T7 RNA聚合酶识别转录出多个RNA拷贝。每一个RNA拷贝再从反转录开始进入下一个扩增循环;同时,带有荧光标记的探针和这些RNA拷贝特异结合,产生荧光。该荧光信号可由荧光检测仪器实时捕获,直观反映扩增循环情况。 * 依赖解旋酶的等温扩增技术 HDA 依赖解旋酶DNA 恒温扩增技术( Helicase-dependent Isothermal DNA Amplification, HDA)是由美国NEB公司研究人员V incent等于2004年发明的一种新型核酸恒温扩增技术。该技术模拟自然界生物体内DNA 复制的自然过程, 在恒温条件下利用解旋酶解开DNA双链, 同时DNA单链结合蛋白( single- stranded DNA - binding protein, SSB )稳定解开的单链, 并为引物提供结合模板, 然后由DNA 聚合酶催化合成互补链。新合成的双链在解旋酶的作用下又解成单链, 并作为下一轮合成的模板进入上述的循环扩增反应, *终实现靶序列的指数式增长。 * 链替代扩增 SDA 链置换扩增术(strand displacement amplification,SDA)是近几年发展起来的一种酶促DNA体外等温扩增方法。在靶DNA两端带上被化学修饰的限制性核酸内切酶识别序列,核酸内切酶在其识别位点将链DNA打开缺口,DNA聚合酶继之延伸缺口3’端并替换下一条DNA链。被替换下来的DNA单链可与引物结合并被DNA聚合酶延伸成双链。该过程不断反复进行,使靶序列被高效扩增。 其基本系统包括一种限制性核酸内切酶、一种具有链置换活性的DNA聚合酶、两对引物、dNTP以及钙、镁离子和缓冲系统。其基本过程包括准备单链DNA模板、生成两端带酶切位点的目的DNA片段、SDA循环三个阶段。 * 交叉引物扩增技术 CPA |