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S-433D拥有Sykam引以为傲的四元线性梯度洗脱技术,这项技术包括耐酸碱盐的全惰性流路、高效在线脱气装置、特殊的梯度阀密封、精密开关控制技术、涡旋微量混合腔,以及专为适合线性梯度洗脱开发的溶液和分析方法包,这些关键技术保证了线性梯度的重复性。采用线性梯度的S-433D相当于针对不同氨基酸选用了不同的洗脱液,大大提高了氨基酸峰的分离度、简化了溶液配制难度,并且,由于具备溶液在线调整功能,无需更换溶液即可轻松改变分析方法,适合质检、研发、监测等各种应用、不同样品。当然,线性梯度技术也完全可以实现多元等度这种简单模式。
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滤色片光路与光栅光路 |
从简化的光路图可以看出,光栅分光光路中波长由反射光的角度决定(光谱带宽约6nm即±3nm,由出口狭缝决定),转动光栅或改变接收器位置可以得到全波段光谱,适合多波长、连续波长或变波长应用,但光栅光路结构复杂、部件多,光路中任何部件的偏移都会影响波长的准确度和重复性。
为克服光栅光路的缺点,1995年,Sykam开发了无需分光的专用干涉滤色片光路,滤色片上镀有多达数十层、总厚度不到0.1mm的复合膜,可保证只有570nm(或440nm)±3nm的光能够透过、且接近100%透过,其他波长全部被膜材料吸收或反射,波长本身的准确度和重复性完全由材料决定,不受震动、温度变化等因素影响。滤色片*外层镀有防灰尘油污且十分坚硬的特殊保护膜,保证滤色片在无需维护的常规环境中稳定数十年,但这种保护膜只能透射或反射小部分波长,无法用来保护需反射全波段光谱的光栅,因此光栅表面易污染,能量衰减速率远远大于滤色片,如果没有专业维护,分析结果难以保证,通常需加大换灯频率以弥补能量衰减的影响。
三种系统配置
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S-433D氨基酸分析仪原理流程图 |
根据分析需求,S-433D全自动氨基酸分析仪可以配置成Li(锂)、Na(钠)、K(钾)三种系统,其中Li和Na系统用于氨基酸和二肽分析,K系统用于生物胺分析。分析氨基酸时,Li系统的分离能力优于Na系统,主要用于生理体液等复杂的游离氨基酸样品;而Na系统成本更低、基线更好、分析速度更快,主要用于蛋白水解或成分简单的游离氨基酸样品。
三种系统对比表
比较项目 | 净分析时间 | 再生平衡时间 | 分离能力 | 缓冲液种类 | |
(图谱时间) | (图谱外) | ||||
Na | 快速程序 | 30 分钟 | 11分钟 | 18种氨基酸 | 2种Na盐 |
标准程序 | 45分钟 | 13分钟 | 22种氨基酸 | ||
加长程序 | 60分钟 | 14分钟 | 25种氨基酸 | ||
Li | 快速程序 | 60分钟 | 13分钟 | 22种氨基酸 | 3种Li盐 |
标准程序 | 105分钟 | 23分钟 | 42种氨基酸 | ||
加长程序 | 160分钟 | 28分钟 | 56种氨基酸 | ||
K | 标准程序 | 37分钟 | 13分钟 | 8种生物胺 | 2种K盐 |
无论哪种系统,如果只分析少数几种物质时,时间都可以缩短;根据实际需求,色谱柱规格及填料可选于氨基酸分析的色谱柱中,150mm色谱柱为标配,175mm、200mm色谱柱为定制。 | |||||
稳定性
精心的设计和精密的加工保证了S-433D氨基酸分析仪的长期稳定性,国内一台用于生产线监测的仪器,从2005年安装后一直是360天*24小时连续运转(相当于普通运转频率的5-8倍),至今已满负荷运转超过10年,只更换过密封圈等常规磨损件,仪器整体性能良好,所测数据与该用户2011年购买的第二台S-433D吻合。因样品量增长,该用户2016年初又购买了第三台仪器,目前三台仪器均正常运行。
技术参数
1. 仪器原理及应用范围 | |
仪器原理 | 阳离子交换分离,茚三酮柱后衍生,固定 双波长检测 |
范围 | Li盐游离系统,一次进样可分离56种氨基酸应用 Na盐水解系统,一次进样可分离25种氨基酸 K盐生物胺系统,一次进样可分离8种生物胺 |
2. 溶液存放单元 | |
隔离保护 | 惰性气体隔离保护所有溶液 |
恒温冷藏 | 内置恒温冷藏,降低温差影响,提高溶液稳定性 |
独立阀门 | 溶液瓶盖带独立阀门,可在分析过程中补液 |
透明罩 | 透明防尘罩,可直接观察液面状况 |
安全装置 | 防茚三酮溶液回流,气压过压保护 |
3.自动进样器 | |
进样模式 | 同时具备环进样及变量进样模式 |
进样体积 | 0μl~500μl |
重现性 | RSD<1%(变量进样),RSD<0.5%(环进样) |
记忆效应 | <0.01% |
样品盘 | 两个盘,120位标准瓶或192位微量瓶 |
温度控制 | 4℃~70℃(电子恒温) |
4.四元梯度泵 | |
特别设计的低脉动泵,脉动低于1%(0.1MPa) | |
活塞 | 浮动式短行程双活塞,自动清洗 |
流速 | 0.000 ml/min~9.999ml/min |
流速稳定性 | RSD<0.1% |
*大耐压 | 40MPa(400bar,6000psi) |
梯度混合 | 四元线性梯度混合,0.1%比例步进 |
在线脱气 | 内置多通道脱气机 |
自诊断功能 | 高压控制、低压控制等 |
5.衍生检测系统 | |
柱温梯度编程 | 20℃~99℃(温度稳定性0.1℃) |
分析柱规格 | PEEK,氨基酸柱4.6x150/175mm 生物胺柱4.6x30mm |
分析柱填料 | 7μm树脂, 10%交联 |
检测器 | 570nm 440nm同时检测, 信号可叠加 |
衍生泵流速 | 0.000 ml/min~2.000ml/min |
流速稳定性 | RSD<0.1% |
反应器温度 | 室温~180℃(温度稳定性0.1℃) |
衍生反应器 | 油浴,惰性PFA反应器 |
安全保护功能 | 过热、泄漏、压力过高等 |
6.系统控制和数据处理软件 | |
兼容性 | WinXP/Vista/7/8/10全兼容,数据可直接导出PDF或粘贴到Word、Excel等办公软件,兼容LIMS数据管理系统软件可控制第三方设备 |
规范认证 | 具有日志记录、权限管理、电子签名等功能 符合GLP、 FDA 21CFR及2015版中国药典 |
一体化 | 仪器控制和数据处理在同一个软件中,方便操作;可由色谱图追溯色谱条件,严格符合21CFR规范 |
易用性 | 原装进口中英文一体,可设置自动计算并输出报告,预置多种可编辑的报告模板 |
智能化 | 自动液面监控,自动冲洗,操作错误或系统异常可报警并自动调用保护程序;具有手机客户端,联网时可远程监视,可在线升级 |
7.系统指标 | |
泵头及管路材料 | 宝石/陶瓷/PEEK/PFA/PTFE等,全惰性材料 |
缓冲液种类 | 氨基酸分析≤3种 生物胺分析2种 |
定性重复性 | 水解标样全部氨基酸RSD<0.5% 精氨酸Arg RSD<0.1% |
峰分离度 | 水解标样氨基酸,水解标准程序:全部大于1.2,平均大于3.3 150mm柱子;全部大于1.4,平均大于3.5 175mm柱子 游离标样氨基酸,游离标准程序:全部大于1.0,平均大于2.5 生物胺标样,生物胺标准程序:全部大于1.2,平均大于3.0 |
*低检测限 | 水解标样全部氨基酸 <8pmol天冬氨酸Asp <2.5pmol(信噪比=2) |
分析时间 | 水解氨基酸30分钟~60分钟;游离氨基酸60分钟~160分钟(仅改变程序即可改变分析时间,无需更换柱子或溶液) |
8.安装参数 | |
外观尺寸 | 72cm×58cm×88cm(W×D×H) |
净 重 | 110kg |
电 源 | 215V~240V,*大功率 750W |
环境温湿度 | 5℃~35℃,相对湿度<90% |
高纯氮气(另配) | >99.99%,输出气压1bar-3bar(0.1MPa-0.3MPa)氮气为保护气,基本不消耗 |