临床实验室中应用的GHB测定方法主要分为两类:
一是基于GHB与非GHB的电荷不同,如离子交换层析、电泳和等电聚集方法
二是基于血红蛋白上糖化基团的结构特点,如亲和层析和免疫实验
(1)亲和层析法:该方法特异性强, 糖化血红蛋白分析仪检测方法不受异常血畿蛋白的干扰。适合于临床科室使用,尤其对小儿患者而言更有优势。其检测结果也完全达到并超过临床要求,CV值5%以内。
(2)高压液相方法(HPLC),可全自动分离测定糖化血红蛋白及血蛋白的变异体和亚型,但仪器的操作保养要求较高,CV值1%以内。
(3)免疫凝集法:原理是糖化血红蛋白与相应的单抗结合进而发生凝集反应,通过测定吸光度来表示凝集量,可用于全自动生化分析仪上进行测定。每次试验均应使用一个新试剂盒,操作前应注意混匀试剂。指出的是免疫凝集法测定糖化血红蛋白,精密度较差,CV值一般不大小5%。
(4)离子捕获法,其原理是糖化血红蛋白与相应抗体结合后, 糖化血红蛋白分析仪检测方法联以荧光标记物,而在IMX反应孔中的玻璃纤维预先包被了高分子的四胺合物,使纤维表面带正电,使前述的反应复合物吸附在纤维表面,经过一系列的清洗后测定其荧光强度,从而得到糖化血红蛋白的浓度,该方法适用于成批糖化血红蛋白标本的检测。
(5)电泳方法:毛细管电泳也能分离检测糖化血红蛋白和血红蛋白质的变异体,但尚无商品化,具有批量样本通过能力的仪器面世,相当程度地限制了该方法的临床应用。
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