细胞培养皿的灭菌方法是使细菌在培养基中生长繁殖,细胞培养皿的灭菌方法以获得大量菌体的一种常用方法。其原理是采用物理、化学或生物学等手段,杀死或抑制微生物的生长和繁殖过程,以达到无菌的目的。常用的有高温消毒法、干热消毒法和辐射杀菌等方法。
高温消毒:将经过预热的器皿放入沸水中煮15~20min或用火焰直接烧灼5~10min即可达到目的;也可用微波辐照进行消毒;还可利用紫外线对空气及物体表面的辐照来杀死细菌;另外还有超高温处理的方法。
干热处理:将经处理的器皿置于100°C左右的干燥箱中烘干3~7d即可达到目的。
辐射杀菌:主要是利用γ射线、X射线等进行杀菌作用。γ射线主要用来杀灭芽胞和非芽孢性微生物,但易引起DNA损伤而导致突变;细胞培养皿的灭菌方法而X线则主要用于破坏细胞的染色体结构并使其死亡,但对细菌无作用力。因此一般只用于需较长期保存的菌种培养基的制备上。
(1)高压蒸汽灭菌法将待处理的器皿放在密闭的高压蒸锅中蒸30min左右即可达到效果;
(2)干热处理用洁净的铁锅或不锈钢容器盛装水或其他液体后置于炉火上烘烤至100°C以上;
(3)辐射杀菌在真空条件下把需要处理的物品放置于钴源灯下照射数小时;
(4)其他如微波辐照等也是较好的处理方法.
(1)高压蒸气压力要足够大气压应保持在0.1MPa以上;
(2)时间不宜太长一般为30~60min左右;
(3)温度不宜太高一般不超过100°C;
(4)防止烫伤注意安全操作
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